PCR en tiempo real para el Streptococcus pneumoniae

La amplificación por PCR es una herramienta indispensable con diversas aplicaciones dentro de la medicina. A menudo, se usa para probar la presencia de alelos específicos y para diagnosticar la presencia de una enfermedad directamente.

Desnaturalización: comienza calentando la reacción a aproximadamente 95 ° C, rompiendo los enlaces de hidrógeno que mantienen unidas las dos hebras de ADN molde.

Hibridación: se produce hibridación del cebador, es decir, el cebador se unirá a su secuencia complementaria en el ADN molde. Para ello es necesario bajar la temperatura a 40-68 °C durante 20-40 segundos

Extensión:  Etapa única que se lleva a cabo a una temperatura de 70-74 °C durante 5-15 minutos tras el último ciclo de PCR. Se asegura que cualquier ADN de cadena simple restante sea totalmente ampliado.

Imagen extraída de: https://pruebacoronavirus.com.mx/blog/como-se-realiza-la-prueba-diagnostica-pcr-en-tiempo-real-para-deteccion-de-covid-19/

Bibliografía:

1. Varacallo M, Mousa G. Biochemistry, Polymerase Chain Reaction. [Internet]: StatPearls;2021. [citado 22 de diciembre del 2021]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK535453/

2. Marimón JM. Métodos de diagnóstico rápido de las infecciones respiratorias. Elservier. 2017 Febrero; 35(5).https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7126338/