PCR en tiempo real para el Streptococcus pneumoniae

La amplificación por PCR es una herramienta indispensable con diversas aplicaciones dentro de la medicina. A menudo, se usa para probar la presencia de alelos específicos y para diagnosticar la presencia de una enfermedad directamente.

Desnaturalización: comienza calentando la reacción a aproximadamente 95 ° C, rompiendo los enlaces de hidrógeno que mantienen unidas las dos hebras de ADN molde.

Hibridación: se produce hibridación del cebador, es decir, el cebador se unirá a su secuencia complementaria en el ADN molde. Para ello es necesario bajar la temperatura a 40-68 °C durante 20-40 segundos

Extensión:  Etapa única que se lleva a cabo a una temperatura de 70-74 °C durante 5-15 minutos tras el último ciclo de PCR. Se asegura que cualquier ADN de cadena simple restante sea totalmente ampliado.

Imagen extraída de: https://pruebacoronavirus.com.mx/blog/como-se-realiza-la-prueba-diagnostica-pcr-en-tiempo-real-para-deteccion-de-covid-19/

Bibliografía:

1. Varacallo M, Mousa G. Biochemistry, Polymerase Chain Reaction. [Internet]: StatPearls;2021. [citado 22 de diciembre del 2021]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK535453/

2. Marimón JM. Métodos de diagnóstico rápido de las infecciones respiratorias. Elservier. 2017 Febrero; 35(5).https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7126338/

Tres pasos básicos para la extracción del ácido nucleico.

El test de ácido nucleico y su extracción va a depender de cuál sea la finalidad de los resultados, en donde generalmente vamos a encontrar 3 pasos básicos:
1- Lisis  de las células que contienen el material genético y otras moléculas de interés. 
2- Desnaturalización de la proteínas por proteasas utilizando mezclas como el  fenol o cloroformo 

3- Purificación de los ácidos nucleicos, mediante solventes orgánicos o por separación magnética  

Video extraído de: https://www.youtube.com/watch?v=aHO981sff-M

Bibliografía: 

Rajesh P, Ostermann E, Wei Q. Advances in point-of-care nucleic acid extraction technologies for rapid diagnosis of human and plant diseases.[Internet]:Biosens Bioelectron; 2020; 169:112592. [citado 14 de diciembre del 2021]. Disponible en : https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7476893/

  

Normas básicas de bioseguridad en el laboratorio de Biología Celular y Molecular

Las tres normas básicas para ingresar al laboratorio  son:

1. Ingresar al laboratorio con el equipamiento necesario, es decir utilizando mandil, gafas, guantes e instrumentos de protección y utilizarlos hasta finalizar la práctica.
2. Está prohibido fumar, beber o comer en el laboratorio. 
3. Mantener la limpieza  del lugar y tener un buen aseo de manos al salir.

A continuación un vídeo que explicará todas las normas básicas que se deben emplear dentro del laboratorio:

Video sacado de:  https://www.youtube.com/watch?v=gJnJr-W8gmE     
Referencias Bibliográficas:

1.-Toaquiza A, Cayo M, Villamar F, Macías F. [sede web]. Manabí-Ecuador. Polo del conocimiento. 2018. [acceso el 6 de diciembre del 2021]. Disponible en: https://polodelconocimiento.com/ojs/index.php/es/article/view/1986

2-Romero M, Isacc M, Huacuja L,Ramos I,Ornelas M,Pérez G. Manual de Prácticas deLaboratorio de Bioquímica.3ra edición.España:McGraw Hill Medica. 2017. [Acceso el 6 de diciembre del 2021]. Disponible en: https://accessmedicina.mhmedical.com/book.aspx?bookid=1496